基因组DNA甲基化作为一种重要的表观遗传修饰系统,在调控基因表达、细胞分化以及其它各种生命过程中起到了非常重要的作用。
5mC是DNA甲基化重要的一种修饰,广泛存在于植物、动物等真核生物,被誉为“第五碱基”。
5hmC是新发现的一种修饰碱基 。
这些化学修饰中,研究得最透彻的是 5-甲基胞嘧啶 (5mC),该修饰被通常认为是基因表达的一种稳定的抑制性调控因子。人类基因组含有大约 1% 的甲基化胞嘧啶,因此其是最丰富、最广泛的 DNA 修饰。
全基因组甲基化测序(WGBS)
· 单碱基分辨率
· 全基因组
· 适合所有有参物种(动植物)
· 适合各种类型样本(细胞、组织、cfDNA、 FFPE等)
· 测序30X以上
简化基因组甲基化测序(RRBS)
· 单碱基分辨率
· 全基因组范围
· 富集启动子/CpG岛甲基化调控区域
· 适合人和哺乳动物、动物及鱼类
· 适合细胞、全血及新鲜冷冻组织
目标区域甲基化测序(Targeted Bisulfite Sequencing)
· 单碱基分辨率
· 针对目标序列,非常灵活
· 适合多种样本类型
· 应用方向:450K/850K芯片筛选的差异甲基化CpG位点(DMS)
焦磷酸测序
· 得到定量序列结果的技术
· 极高的准确性
· 重现性好
· 实验设计灵活
DNA甲基化芯片-850K
· 全面的基因组覆盖范围:检测>853,000个CpG位点,全面覆盖CpG岛、启动子、编码区、开放染色质和增强子。此外还包括CpG岛外的CpG位点,已知DMR位点,脱氧核糖核酸酶超敏位点以及miRNA启动子区域。
· 高质量的数据:同时采用Infinium I及II探针设计,使检测范围最大化。
· 分辨率高:单碱基分辨率,可以直接检测到发生甲基化的确切位点。
· 可重复性高: 自身技术重复相关性R2 > 0.98;与450K交集探针间相关性R2 > 0.98。
· 起始模板量低:仅需 250ng,大大节约了样品量。